您現在的位置是:首頁 >要聞 > 2023-08-28 15:00:17 來源:
石蠟切片怎么保存(石蠟切片)
大家好,我是小夏,我來為大家解答以上問題。石蠟切片怎么保存,石蠟切片很多人還不知道,現在讓我們一起來看看吧!
1、腸道的石蠟切片的制作
2、(1) 取材:用鋒利的刀切取羅非魚的一小段前腸(據胃5cm左右位置的前腸),組織塊的規格為 3~5mm×3~5mm×10~15mm。
3、(2) 固定:采用Bouin氏固定液裝瓶固定,固定液用量一般為組織塊體積的10~20倍。
4、(3) 沖洗:固定12~24h后,將材料自固定液中取出后,在70%酒精中換洗幾次,可在酒精中加幾滴氨水至洗去黃色為止。
5、(4) 脫水:70%酒精(1h)→80%酒精(1h)→90%酒精(1h)→95%酒精(1h)→無水乙醇Ⅰ(1h)→無水乙醇Ⅱ(1h)
6、(5) 透明:無水乙醇與二甲苯溶液(1:1)(1h)→二甲苯Ⅰ(1h)→二甲苯Ⅱ
7、 (1h)
8、(6) 浸蠟:浸蠟的全過程應在恒溫設備中進行,將恒溫箱調至58℃。
9、 二甲苯與石蠟混合液(1:1)(1h)→石蠟Ⅰ(1h)→石蠟Ⅱ(1h)
10、 浸蠟必須徹底,否則組織內殘留透明劑會造成切片過程的困難和影響切片
11、 的質量。
12、(7) 包埋:在小紙盒內注入溶化的石蠟,將已浸蠟的組織塊置入其內,使蠟塊迅速冷卻硬固,組織塊在蠟塊中可長期保存。
13、(8) 切片:包埋后的組織塊經修整后,用切片機切成5~7μm的石蠟帶。
14、(9) 粘片:將組織石蠟帶在50攝氏度的溫水中展片,然后用經1%HCl溶液處理干凈的載玻片撈片,組織帶即可粘在載玻片上。
15、(10) 烤片:將粘好的載玻片置于35℃左右的溫箱中烤干,待2~3小時后,即可取下編號。
16、(11) 蘇木精—伊紅染色:將烤干的片進行染色。
17、①脫蠟:將烤干的切片放入二甲苯(I)10min→二甲苯(Ⅱ)10rain。
18、②復水:將脫蠟后的切片移入100%酒精5min→95%酒精5min→85%酒精5min→70%酒精5min→蒸餾水5min
19、③HE染色顯示腸道黏膜上皮內淋巴細胞:將蒸餾水洗滌后的切片移入Harris蘇木精液中,10min,使細胞核著色;用自來水洗去切片上殘余染液;用1%的鹽酸酒精分色3秒;用自來水浸洗3h,顯微鏡下觀察,直到胞核藍化為止;然后切片入曙紅溶液中染色5min,使細胞質著色。經95%酒精與100%酒精脫水,二甲苯透明后,中性樹膠封片。
20、④奧新蘭一沙黃染色顯示腸道內肥大細胞:切片常規脫蠟下行至蒸餾水→奧新蘭一沙黃液染色15~20min→蒸餾水速洗,鏡檢→95%和100%酒精分色脫水1—2min→二甲苯透明→中性樹膠封片。
21、⑤阿利新蘭醋酸染色顯示腸道內杯狀細胞:切片經脫蠟下行入蒸餾水→阿利新蘭醋酸染色10min→蒸餾水洗→1%高碘酸水液氧化5min→蒸餾水略洗一Schiff試劑染色(37℃恒溫箱)30min→普通水洗3次→蒸餾水2min→Ehrlich蘇木精染色5min→95%酒精和100%酒精脫水→二甲苯透明,中性樹膠封片。
22、切片經脫蠟下行入水:二甲苯(30 min)一二甲苯(10 min)一無水乙醇(5 min)一無水乙醇(5 min)一
23、95% 乙醇(5 min)一85%乙醇(5 min)一70% 乙醇(5 min)一流水沖洗(20 min)。人Ehrlich蘇木精染
24、色12 min,蒸餾水速洗。鹽酸酒精分色,鏡檢控制時間。入伊紅染色2 min,蒸餾水略洗。鹽酸酒精分色,鏡檢控制時間。經95%酒精與無水酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。
25、阿利新蘭—番紅復合染色液的方法稱Scaba法
26、阿利新蘭—番紅分別染色的方法稱Spicer法
本文到此講解完畢了,希望對大家有幫助。