您現在的位置是:首頁 >要聞 > 2023-08-05 02:40:12 來源:
t載體的作用(t載體)
導讀 大家好,我是小夏,我來為大家解答以上問題。t載體的作用,t載體很多人還不知道,現在讓我們一起來看看吧!1、通過克隆甘露聚糖酶基因到pMD...
大家好,我是小夏,我來為大家解答以上問題。t載體的作用,t載體很多人還不知道,現在讓我們一起來看看吧!
1、通過克隆甘露聚糖酶基因到pMD-18T載體構建了質粒pMD-18Tman2XcmI,克隆的甘露聚糖酶基因兩側各引進了一個特定的XcmI 酶切位點;用XcmI酶切質粒pMD-18Tman2XcmI可以制備T載體.因為甘露聚糖酶基因作為填充片段和篩選標記受半乳糖苷酶基因啟動子的控制,甘露聚糖酶能夠表達,從而水解甘露聚糖產生水解圈,指示轉化了部分酶切質粒的背景菌落.此外,在甘露聚糖酶基因中存在第3個不同序列的XcmI酶切位點,因此殘余的甘露聚糖酶基因引起的背景可以進一步降低.抽提大量質粒貯存,隨時制備T載體使用,增加了克隆的穩定性.該T載體克服了一般T載體質量不穩定,費錢,克隆效率低,假陽性高的缺點.使用構建的T載體完成了10個基因的克隆,結果表明重組效率達到了90%~100%.。
本文到此講解完畢了,希望對大家有幫助。