斐林試劑檢測還原糖原理（菲林試劑）

大家好，我是小夏，我來為大家解答以上問題。斐林試劑檢測還原糖原理，菲林試劑很多人還不知道，現在讓我們一起來看看吧！

1、斐林試劑和班氏試劑的使用方法及原理不盡相同。斐林試劑和班氏試劑都是檢驗還原性糖的試劑，二者的使用方法及原理、成分也有區別，下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡單總結。

2、斐林試劑和班氏試劑

3、關于斐林試劑和班氏試劑，可用下面的例題引出其異同點：例：你可用什么方法，檢驗人的尿液中是否含有糖？

4、答案：

5、方法一：在試管中加入人的尿液0.1mL，加入班氏糖定性試劑1mL，混合均勻后，將試管放入盛有開水的燒杯中，加熱煮沸1min~2min，若試管中溶液在加熱后產生了磚紅色沉淀，說明尿液中含有糖。

6、方法二：取少許尿液加水稀釋后，加入剛配制好的斐林試劑，沸水浴加熱后，若出現磚紅色沉淀，則說明尿液中含有糖。

7、方法三：取少許尿液加水稀釋后，加入少許Cu(OH)2懸濁液（新制）加熱，若出現磚紅色沉淀，則說明尿液中含有糖。

8、由以上例題可以看出，斐林試劑和班氏試劑都能用于鑒定可溶性還原糖（上題中檢驗的是葡萄糖）的存在，二者有相同點，也有不同點。

9、二者的不同點歸納

10、（1）班氏試劑常用于尿糖的鑒定，其配方與斐林試劑不一樣，其配方為：

11、①400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無水碳酸鈉；

12、②50mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅。制成溶液；

13、③把CuSO4溶液倒入檸檬酸鈉溶液中，邊加邊攪，如產生沉淀可濾去。

14、（2）其反應原理與斐林試劑略有差別。利用斐林試劑鑒定時，斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應生成酒石酸絡銅離子

15、酒石酸絡銅離子和可溶性還原糖在加熱條件下反應產生磚紅色沉淀。而班氏試劑中的產生卻是這樣的：檸檬酸鈉作為絡合劑，由碳酸鈉提供堿性。CuSO4與檸檬酸鈉溶液和Na2CO3溶液混合時生成檸檬酸絡銅離子，檸檬酸絡銅離子與葡萄糖中的醛基反應生成磚紅色沉淀。

16、（3）兩種試劑的保存方式不同。斐林試劑甲和斐林試劑乙混合后會因酒石酸有一定的還原性而自發地緩慢產生氧化亞銅沉淀，因此斐林試劑一般為現用現配；而班氏試劑的配方中，檸檬酸鈉比較穩定，實際堿性也不強，不易還原銅離子產生氧化亞銅沉淀，因此該試劑可長期保存。

17、當然，無論用班氏試劑還是斐林試劑，歸根結底都是二價銅與醛基在沸水浴加熱條件下反應而生成磚紅色的沉淀，兩者反應現象一樣，這就是二者的相同之處。 斐林試劑和雙縮脲試劑

18、斐林試劑和雙縮脲試劑都由NaOH溶液（斐林試劑中還有酒石酸鉀鈉）和CuSO4溶液組成，但二者有如下三點不同：

19、（1）溶液濃度不同

20、CuSO4溶液稱為斐林試劑乙，其濃度為0.05 g/mL；

21、CuSO4溶液（雙縮脲試劑B）的濃度為0.01 g/mL。

22、（2）使用原理不同

23、斐林試劑是新配制的溶液，它在加熱條件下與醛基反應，被還原成磚紅色的沉淀，可用于鑒定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色→棕色→磚紅色（沉淀）。

24、鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑，發生的是雙縮脲反應。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在堿性溶液中能與Cu2+絡合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。

25、（3）使用方法不同

26、斐林試劑使用時，先等體積混合甲、乙兩液，而后立即使用，反應需要加熱（有時不加熱也反應）；雙縮脲試劑使用時，先加入NaOH溶液（1mL），振蕩搖勻，造成堿性的反應環境，然后再加入3~4滴CuSO4溶液，振蕩搖勻后觀察現象。

本文到此講解完畢了，希望對大家有幫助。