您現在的位置是:首頁 >動態 > 2023-07-22 14:44:09 來源:
菌種傳代怎么算一代(菌種傳代)
大家好,我是小夏,我來為大家解答以上問題。菌種傳代怎么算一代,菌種傳代很多人還不知道,現在讓我們一起來看看吧!
定期移植法,亦稱傳代培養保藏法,包括斜面培養、穿刺培養、液體培養等。是指將菌種接種于適宜的培養基中,最適條件下培養,待生長充分后,于4~6℃進行保存并間隔一定時間進行移植培養的菌種保藏方法。
? 操作步驟如下:
1?培養基制備
1.1?器皿準備
? 培養基制備過程中所用的一些玻璃器皿,如三角瓶、試管、培養皿、燒杯、吸管等,經洗滌、干燥、包裝、滅菌后使用。
1.2?溶解培養基配料
? 先在燒杯中放適量水,按培養基配方稱取各項材料,依次將緩沖化合物、主要元素、微量元素、維生素等材料加入水中溶解,最后加足水量,攪拌均勻。
1.3?調pH值
? 配料溶解后將培養基冷卻至室溫,根據要求加稀酸(0.1mol/L鹽酸)或稀堿(10%氫氧化鈉)調pH值。加酸或堿液時要緩慢、少量、多次攪拌,防止局部過堿或過酸而導致測量不準確和營養成分被破壞。
1.4?加凝固劑
? 配制固體培養基時需加凝固劑,如瓊脂、明膠等。將凝固劑加入液體培養基中,加熱并不斷攪拌至融解,再補足所蒸發水分。
1.5?過濾分裝
? 在二層紗布中間夾入脫脂棉,將配好的培養基趁熱過濾并分裝。斜面培養基分裝量約為試管高度的四分之一(4~5mL),穿刺培養基分裝量以試管高度的二分之一為宜。分裝過程中勿使培養基沾污管口,以免弄濕棉塞造成污染。
1.6?包扎標記
? 將試管加棉塞,外面包扎一層牛皮紙或鋁箔并注明培養基名稱及配制日期。
1.7?滅菌
? 根據要求將培養基滅菌,通常蒸汽滅菌為121℃,15~20min。
1.8?斜面擺放
? 滅菌后及時擺放斜面,斜面長度不超過試管管長的二分之一為宜。
1.9?無菌檢查
? 將滅菌的培養基放入培養箱中作無菌檢驗,通常30℃培養1~3天。無菌檢查合格后將其保存于4℃下備用。
2?接種
2.1?斜面接種
2.1.1?點接
? 把菌種點接在斜面中部偏下方處。適用于擴散型生長及絨毛狀氣生菌絲類霉菌(如毛霉、根霉等)。
2.1.2?中央劃線
? 從斜面中央自下而上劃一直線。適用于細菌和酵母菌等。
2.1.3?稀波狀蜿蜒劃線法
? 從斜面底部自下而上劃“之”字形線7a686964616fe59b9ee7ad9431333431353337。適用于易擴散的細菌,也適用于部分真菌。
2.1.4?密波狀蜿蜒劃線法
? 從斜面底部自下而上劃密“之”字形線。能充分利用斜面獲得大量菌體細胞,適用于細菌和酵母菌等。
本文到此講解完畢了,希望對大家有幫助。