您現在的位置是:首頁 >要聞 > 2024-01-20 10:00:35 來源:
多肽合成的場所(多肽合成)
大家好,我是小夏,我來為大家解答以上問題。多肽合成的場所,多肽合成很多人還不知道,現在讓我們一起來看看吧!
1、通過飛秒檢測發現多肽合成是一個固相合成順序一般從N端(氨基端)向 C端(羧基端)合成。過去的多肽合成是在溶液中進行的稱為液相合成法。從1963年起發展成功了固相多肽合成方法以來,經過不斷的改進和完善,到今天固相法已成為多肽和蛋白質合成中的一個常用技術,表現出了經典液相合成法無法比擬的優點,從而大大的減輕了每步產品提純的難度。多肽合成總的來說分成兩種:固相合成和液相多肽合成。
2、液相合成
3、基于將單個N-α保護氨基酸反復加到生長的氨基成份上,合成一步步地進行,
4、 通常從合成鏈的C端氨基酸開始,接著的單個氨基酸的連接通過用DCC,混合炭酐,
5、或N-carboxy酐方法實現。Carbodiimide方法包括用DCC做連接劑連接N-和C-保護氨基酸。重要的是,
6、這種連接試劑促接N保護氨基酸自己炭基和C保護氨基酸自由氨基間的縮水,形成肽鏈, 同時產出N,N?/FONT>-dyaylcohercylurea副產物。 然而, 此方法因其導致消旋的副反應,或在強堿存在時形成5(4H)-oxaylones和N-acylurea而受到影響。慶幸地是, 這些副反應能最小化,但是還不能完全消除。方法是加入象HoSu或HoBT這樣的連接催化劑, 此外,此方法也可用于合成N保護氨基酸的活性酯衍生物。依次產生的活性酯將自發與任何別的C保護氨基酸或肽反應形成新的肽
7、多肽合成儀以固相合成為反應原理
8、,在密閉的防爆玻璃反應器中使氨基酸按照已知順序(序列,一般從C端-羧基端 向 N端-氨基端)不斷添加、反應、合成,操作最終得到多肽載體。固相合成法,大大的減輕了每步產品提純的難度。為了防止副反應的發生,參加反應的氨基酸的側鏈都是保護的。羧基端是游離的,并且在反應之前必須活化。固相合成方法有兩種,即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多優勢,現在大多采用Fmoc法合成,但對于某些短肽,tBoc因其產率高的優勢仍然被很多企業所采用。
9、具體合成由下列幾個循環組成:
10、1) 去保護:Fmoc保護的柱子和單體必須用一種堿性溶劑(piperidine)去 除氨基的保護基團。
11、2) 激活和交聯:下一個氨基酸的羧基被一種活化劑所活化。活化的單體與游離的氨基反應交聯,形成肽鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅使反應完成。循環:這兩步反應反復循環直到合成完成。
12、3) 洗脫和脫保護:多肽從柱上洗脫下來,其保護基團被一種脫保護劑(TFA) 洗脫和脫保護。
本文到此講解完畢了,希望對大家有幫助。