凝膠過濾層析名詞解釋（凝膠過濾層析）

大家好，我是小夏，我來為大家解答以上問題。凝膠過濾層析名詞解釋，凝膠過濾層析很多人還不知道，現在讓我們一起來看看吧！

1、原發布者:csgp200

2、凝膠過濾層析的基本操作①凝膠介質的選擇根據待分離蛋白質的分子量選擇具有相應分離范圍的凝膠。對于未知蛋白，應選用分離范圍較寬的凝膠，如用SephacrylS-300。對于分子量在3~5kDa的蛋白質，脫鹽時應選用SephadexG50或G25；而對于小分子量多肽物質（1~5kDa），脫鹽則應選用SephadexG10或SephadexG15。②凝膠介質的處理和裝柱商品凝膠一般是干粉，使用前應用水溶脹。一般情況下，1份凝膠加十份水，自然溶脹至少24小時。溶脹后，將上清中細小的凝膠碎塊棄除，重新攪拌懸起，待凝膠沉淀后，再次棄去凝膠碎塊，重復數次，直到液相澄清為止。為加速溶脹，可將凝膠煮沸一小時，該法同時具有滅菌的作用。凝膠過濾層析柱的長與直徑的比例應為50~100:1。裝柱時柱體要垂直，先在柱內加入約1/3柱床體積的水或緩沖液，然后沿柱一側將緩沖液中的凝膠（凝膠：緩沖液=3：1）攪拌均勻，緩慢并連續地一次性注入柱內。裝柱過程中，要避免柱內緩沖液流干，注意保持柱體凝膠均勻無氣泡和裂縫。裝完后，可用2ml藍色葡聚糖溶液檢查柱體的均勻性。如柱體均勻，可見藍色區帶均勻平穩地通過凝膠，不留任何條紋。要保持凝膠和緩沖液溫度一致，以減少氣泡的產生。③上樣凝膠過濾柱層析對于樣品的體積有嚴格的要求。樣品體積不應超過柱床體積的1~5%，如超過5%，則會導致分離效率降低，低于1%則分離效率也不會提高，所以蛋白質樣品應盡可能濃縮至10~20mg/ml。樣品本身對洗脫液的相對粘度不能超過2

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